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研究基因扩张不平衡和基因丢失现象发生几率

2014年10月31日 论文检测样例 ⁄ 共 1547字 ⁄ 字号 暂无评论 ⁄ 阅读 417 views 次

gocheck论文检测10月31日检测样例:

【摘要】目的 讨论研究分别使用Profiler PlusTM、IdentifilerTM以及Powerplex®16扩增试剂盒用于检验血样DNA检验结果的差异并研究其扩张不平衡和基因丢失现象发生几率。  方法 选取150例完全无血缘关系的个体作为研究对象并采集其血样,分别使用两种扩增试剂盒进行检验。对所得不同结果的同一对象再使用三种扩增试剂盒进行检验。将检验所得结果进行比较。结果 等位基因缺失率三种试剂盒无显著差异(P>0.05)。Profiler PlusTM其扩张不平衡率显著高于其余两种试剂盒(P<0.05)。 结论 使用不用PCR扩增试剂盒对血样DNA进行检测时会出现不同位置的异常基因,可表现为基因缺失及扩增不平衡。但Profiler PlusTM其检验结果扩增不平衡发生率显著高于其余两种试剂盒。在实际生活对血样DNA进行检测时,除需准备主要检测扩增试剂盒外,还需准备其他不同类备用试剂盒用于互相验证及对比,尽量降低基因等位缺失及扩张不平衡发生率。

【关键词】不同PCR扩增试剂盒;无血缘关系个体;血样DNA检验结果;差异及对比研究

  目前聚合酶链式反应技术已广泛应用到基因分离、克隆,核酸序列分析,疾病诊断、DNA检验等多个领域。该技术主要是指一种体外酶促合成特异DNA的方法。近年来DNA检验技术在法医学领域中被广泛使用,主要遗传系统包括Profiler PlusTM、IdentifilerTM以及Powerplex®16,可在各类犯罪案件、数据库管理重建等项目中得到广泛应用。大部分研究证明,使用这三种PCR扩增试剂盒渐渐结果科学性及可靠性高,具有较高的实用价值。但是干检验仍然会出现基因缺失或扩增不平衡现象。本实验为研究不同扩增试剂盒用于检验血样DNA结果的差异与临床价值,特选取150例无血缘关系个体临床资料进行分析。现将试验结果汇报如下。

资料和方法

1.1临床资料 随机选取150例完全无血缘关系个体。所有个体均为汉族1;其中男64例,女36例;年龄26-42岁,平均年龄(34.3±8.2)岁。100例个体均来源于本次试验实验室数据库积累。设备仪器使用ABI公司提供ABI3100型基因分析仪以及9700型PPCR扩增仪器。

1.2 治疗方法 对所有血样采集检验个体均使用硅珠法进行提取DNA。应用10μl扩增反应体系应用于PCR扩增。使用ABI-9700扩增仪进行扩增。反应体系中成分以及热循环参数设置、检测方法等根据仪器说明书进行设置及操作。Profiler PlusTM扩增试剂盒使用Rox-500内标;IdentifilerTM扩增试剂盒使用Liz-599内标;Powerplex®16使用ILS-600内标。分析师分别使用Matrix顺序为set F, set G5, set Z。分析软件应用GeneMapper ID v3.2分析软件。使用相对应标准阶梯等位基因为标准进行基因型分型。对于IdentifilerTM以及Powerplex®16扩增试剂盒加入0.05ng、0.075ng、1ng至8ng的9947A模版DNA进行扩增与检测。

16.3疗效观察 观察治疗前后患者各脏器功能指标变化、症状缓解情况及治疗总有效率等指标。其中总有效率标准可记为:治愈:治疗后所有不适症状完全消失;生理病理检查指标完全恢复正常且无其他症状。显效:治疗后各种不适症状均显著改善,呕吐、剧烈泄泻等现象发生每天少于3次且各项生理病理检查指标较前改善超过80%。有效:治疗后不适症状仍存在,但较治疗前有所改善,各项生理病理检查指标较前恢复超过30%。无效:治疗后患者各种不是症状仍存在甚至加重;各项检查指标未有明显改善甚至死亡。总有效率=(显效+有效+治愈)/总人数×100%。

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